数字PCR技术服务

数字 PCR 技术原理与优势

一、数字 PCR 技术原理

  1. 核心逻辑:无需标准曲线,直接对靶标分子进行绝对定量。
  2. 技术流程
    • 分样(体系制备):将样本核酸分子分散成大量微体系单元,每个单元含 0 个、1 个或多个靶标 DNA 模板;
    • 扩增(微体系生成):微体系独立平行扩增;
    • 统计(芯片阅读 + 结果计算):含靶标分子模板的单元发荧光信号,软件根据阴阳信号比例及泊松分布原理,计算靶标分子初始浓度或拷贝数,最终结果呈现为 “XX copies/μl”。

二、技术优势

  1. 绝对定量:区别于荧光 PCR 的扩增曲线法,采用终点法判读,直接获得靶核酸的绝对浓度值或拷贝数。
  2. 高灵敏度:将核酸分子分散到数万个反应单元,独立荧光检测,可检测低丰度突变,分辨拷贝数微小差异。
  3. 强耐受性:高度分散的体系降低组分内抑制因素对 PCR 反应的影响,保证扩增效率。

三、实验流程与效率

  1. 流程步骤:①体系配制→②样本制备→③PCR→④芯片阅读及分析
  2. 检测效率:单批检测时间<2.5 小时


具体实验请电话联系:010-82893546。